分光光度计的计量校准

光度计概述

1.    不同的物质在水溶液中对不同波长的光具有选择性吸收的特性，分光光度计正是利用了这一特性，根据物质的分子对特定波长或一定波长范围内光的选择性吸收和朗伯-比尔定律对物质进行定量分析和定性鉴别的仪器。比如，重铬酸钾水溶液（浅黄色）在440nm光（深绿色）的照射下有很强的吸收峰，吸收值A的大小与溶液的浓度成正比，即A = klc， 其中 k 为物质的吸光系数，l 为光垂直穿过被分析物质的光程长度， c 为溶液的浓度。

2.    分光光度计主要有光源、单色器、样品室、检测器、信号处理单元和显示器组成。

常见分光光度计

3.    分光光度计的类型：

a.     可见分光光度计：结构相对简单，因其可选择使用波长的单色光都在 人的视觉范围内，故称之为可见分光。按说明书提供的指标，选择波长在340nm~800nm（人的可见视觉范围为400nm~700nm），此类仪器结构简单、成本较低，但用途广泛，也是理化实验室最常见、最传统的仪器之一。

b.     紫外可见分光光度计：在可见分光光度计的基础上增加紫外波长的单色光，其紫外波长可选范围一般在190nm~340nm之间。相较可见分光光度计，紫外分光光度计除了增加了紫外光区光源——氘灯外，还多了提供给氘灯正常工作起辉的高压、稳压、整流电源，以及单色器单元相应的光学玻璃部件。紫外分光光度计所选用的元器件质量要求相对较高，仪器的各项技术指标相对优于可见分光光度计，故成本也相对高些。

c.     单光束类分光光度计：以上两种分光光度计都可统称为单光束类分光光度计。

d.    双光束类分光光度计：相对于单光束类分光光度计，此类光度计在单色器方面多出了一路对称的单色光，目的是增强抗干扰性，使仪器工作更稳定。高端的分光仪器都采用双光束原理制造而成。

校准依据与方法

1.    校准依据：开展此类仪器校准的依据是：JJG178-2007《紫外、可见、近红外分光光度计检定规程》。

普标资质证书

2.    校准内容及相应的标准器：

a.    波长最大允许误差及重复性：主要是校准仪器单色器发出来的单色光波长的误差。普标所选用的标准器为：氧化钬滤光片（测量范围在240nm~640nm）和镨钕滤光片（测量范围在440nm~900nm）。

b.    透射比最大允许误差及重复性：主要是校准仪器在不同波长光下对物质吸收的准确度。普标所选用的标准器为：紫外分光光度计溶液标准物质和可见光透射比滤光片。

c.     噪声与漂移：主要是校准仪器正常工作中的抗干扰力与连续时间内的稳定性。

d.    基线平直度：校准带自动波长扫描仪的不同波长在满度100%透射下的稳定程度。

e.    杂散光：校准仪器的单色器发出来的各种波长单色光的单色纯度，即是否含有其他波长的杂光成分，普标使用杂散光滤光片标准物质进行校准。

f.     吸收池的配套性：主要是校准比色池与比色池之间透光程度的一致性。造成比色池之间透光度不一致的原因， 一是制造加工工艺精度的缺陷造成两透光玻璃面的距离差异，使得溶液光程长度不一致；二是，使用一段时间后酸碱溶液对玻璃面的腐蚀造成透光度的差异。

普标使用部分滤光片

3.    仪器的等级及校准周期：

根据校准结果，仪器可以分为I、II、III、IV级。I级指标要求最高、最好，IV级最劣，超过IV级中任一指标的仪器将被定为不合格仪器。

根据规程规定，校准周期一般不超过1年。

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